外泌体（exosome，EXOs）是一种可由多种细胞分泌、直径为30- 150nm内吞起源的膜结合囊泡。而工程化外泌体是指通过遗传或化学方法改变外泌体的囊泡含量、囊泡膜组分和运输介质，使其具有特定的生物学功能以增强其稳定性、目标靶向性。常见的改性策略主要分为基因工程和化学修饰。基因工程主要是指将外源性的基因导入到母体细胞中，基因在母体细胞中复制、转录和翻译，从而使母体细胞可以特异性的高表达靶向蛋白或多肽，分泌靶向特异性外泌体。化学修饰是指通过化学键将功能配体偶联到外泌体表面或通过脂质组装将两性分子插入到外泌体的脂质双分子层中，从而将天然或合成的配体装载到外泌体上[1, 2]（图一）。

间充质干细胞衍生的外泌体（Mesenchymal stem cell-derived exosomes，MSC-EXOs）与工程技术相结合，在骨关节炎[3]、中枢神经系统[4]等多种疾病治疗方面取得了令人满意的效果。了解MSC- EXOs工程化的研究进展，可能会为眼部疾病的治疗提供新的前瞻性治疗技术。

DED又名角结膜干燥征，通常以泪膜稳态丧失并伴随着眼表症状为特征，是一种非常常见的眼部疾病。目前全球DED发病率约为5.5%-33.7%，我国的发病率约为21%-30%，且患病率随着年龄的增长而显著增加[5]。

近年来，随着人们生活方式和工作方式的改变：电子产品的频繁使用、长时间的伏案工作、近距离作业等导致患干眼症的人群逐年增加。如何避免DED保护眼健康成为了一个亟待解决的公共卫生问题。相关研究显示，Ma等[6]利用化学手段将抗坏血酸（AA）还原的金纳米颗粒（AuNPs）沉积在MSCs-EXOs磷脂膜上，对EXOs进行工程化改造。改造后的EXOs相较于任何单一成分，更有效地促进了角膜细胞生长，降低角膜活性氧水平，恢复泪液分泌和抗炎能力，显著改善DED症状（图二）。

EAU是一种主要由免疫失调引起的危及视力的眼内炎症。研究显示，单独的MSCs- EXOs对免疫抑制的能力较弱，对EXOs进行工程化改造后，可以提高免疫抑制的能力，改善受损或者患病的组织器官。

研究人员利用基因工程技术在MSCs中过表达IL-10，结果发现，过表达IL-10的MSCs- EXOs（sEV-IL10）可以通过抑制T细胞增殖和Th1、Th17细胞分化，促进Treg细胞分化，增加在靶器官中的富集，显著增强MSCs- EXOs对EAU的治疗效果[7]。此研究提示，工程化外泌体技术在治疗EAU或者其他自身免疫性疾病方面具有巨大的潜力。

RP是一组进行性、遗传性和营养不良的退行性疾病，由于视网膜色素上皮细胞功能的逐渐丧失和光感受器的进行性凋亡而导致的不可逆的视觉损伤。其中，细胞凋亡在诱导光感受器死亡进而促进上皮细胞功能丧失中发挥了重要作用。

因此，研究者可以利用基因工程技术手段将具有抗凋亡功效的miRNAs在MSCs中过表达，工程MSCs释放的EXOs将携带上调的miRNAs，进而收获具有抗凋亡功效的工程化EXOs，用于RP的治疗[8]。如有必要，可以在MSCs中过表达不同功效的miRNAs，如抗炎、抗氧化、抗血管生成、免疫调节等，最终得到改造后的EXOs，用于眼部疾病的治疗（图三）。

湿性AMD是一种视网膜下脉络膜层新生血管生长的情况。目前治疗湿性AMD首选方案是在玻璃体内注射抗血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）试剂。虽然VEGF可以显著改善患者的症状，但是患者之间的个体差异会造成治疗无效性和耐药性。因此，为了达到最佳治疗效果和持续时间，同时最大限度地减少潜在不良反应，可以将抗-VEGF试剂与抗炎、抗凋亡和抗氧化工程化MSCs-EXOs进行复合，发挥出协同增强的功效[8]（图四）。

目前，对MSCs的研究已经逐渐从MSCs转变到MSC- EXOs，提示MSCs- EXOs有潜力作为一种无细胞治疗技术取代MSCs，成为应对多种疾病的新方法。EXOs在治疗眼部疾病方面具有稳定性高、毒性和免疫原性小、递送效率高、纳米载体渗透强等优点。但是，其产量有限、长期效果不明确和异质性高等缺点限制了MSCs- EXOs在眼部疾病中的应用。同样，工程化MSCs- EXOs也面临着大量生产、存储方式、工程过程质量控制、工程产品稳定性控制等诸多挑战。工程化MSCs- EXOs作为眼部疾病治疗策略的研究才刚刚开始。

随着对MSCs- EXOs成分及其潜在机制进行更深入的研究，外泌体工程技术的不断进步，封装MSCs- EXOs的新型纳米颗粒、水凝胶或合成生物材料尖端技术的不断发展，相信工程化MSCs- EXOs的靶向性和治疗效果将得到实质性的增强。

无论如何，有希望的是，工程化的MSCs- EXOs可能代表下一代靶向递送载体，能够将具有生物学意义和临床治疗效果的独特治疗药物装载到MSCs- EXOs中，使其能够特异性靶向病变组织，为眼部疾病的精确、个性化治疗提供一种新的、更有效的工具。