嵌合抗原受体（CAR）T细胞治疗在治疗复发/难治性B细胞恶性肿瘤方面已显示出显著的效果。针对血液肿瘤和实体肿瘤的新的靶点的开发和已有靶点的应用领域的扩展是一个快速发展的研究领域。在CAR-T产品的早期研发阶段，新鲜输注和冷冻保存都是研究者可能的选择，但是在产品的后期研发阶段，大都会选择冷冻保存的方式。

△ 图片来源于摄图网

      冷冻保存的CAR-T产品对于CAR-T产品的广泛应用具有很多优势：

      首先，冷冻保存的CAR-T产品，克服了运输距离的限制，可以实现长距离、长运输时间的运输而不影响细胞产品的质量；

      其次，冷冻保存的CAR-T产品可以保证所有的放行检测都可以在细胞给予患者之前完成，完善了质量控制，从而保证了产品使用的安全性；

      第三，冷冻保存的CAR-T产品，可以根据患者的情况，选择最佳的输注时间，从而方便医生应对临床上随时可能出现的特殊情况，而不用担心新鲜CAR-T细胞的保质期。在已经上市的CAR-T产品中，也都是冷冻保存的。

      因此，报告有效数据也都是基于冷冻产品的输注。

△ 图片来源于摄图网

      然而，关于冷冻保存对CAR-T细胞功效的影响褒贬不一。随着技术的进步，自动化和半自动化的CAR-T细胞培养模式应用越来越广泛，和传统手工制备的CAR-T细胞相比，可能会出现CAR-T细胞特性的变化。程序性降温仪的应用也可能会影响CAR-T细胞冻融过程。业界担心的CAR -T细胞冷冻保存的主要问题是由于细胞经历冻融循环而导致的有效性降低或毒性增加。因此，尚需对冷冻保存的CAR T细胞产品进行广泛研究。

       美国国家癌症研究所在2023年最新的一篇文章 《Cryopreserved anti-CD22 and bispecifific anti-CD19/22 CAR T cells are as effective as freshly infused cells》中，回顾性地在两组儿童和年轻成人患者中，比较了接受冷冻保存和新鲜CAR-T细胞治疗B细胞白血病的患者之间的临床结果。其中40例患者接受抗CD22 CAR-T细胞（21例患者接受冷冻保存的CAR-T细胞；19例患者接受新鲜的CAR-T细胞）治疗。19例患者接受抗CD19/22 CAR-T细胞（11例患者接受冷冻保存的CAR-T细胞，8例患者接受新鲜的CAR-T细胞）治疗。该文章中回输的所有的CD22 CAR-T细胞都采用了培养袋的培养方式，所有的CD19/22 CAR-T细胞都采用了Prodigy系统培养。

△图1 接受新鲜和冻存CAR-T细胞回输的患者在体内

扩增、反应性和毒性方面无显著差异

      如图1所示，文章从CAR-T细胞回输的患者在体内扩增和持续时间、反应性和毒性方面三个方面评估了新鲜和冻存制剂对于患者的影响。

      结果发现，40例接受抗CD22 CAR-T细胞（21例患者接受冷冻保存的CAR-T细胞；19例患者接受新鲜的CAR-T细胞）治疗的患者中，21例接受冷冻保存的CAR-T细胞治疗的患者，和19例接受新鲜的CAR-T细胞的患者相比，在体内扩增和持续时间、反应性和毒性方面三个方面均无显著性差异。19例接受抗CD19/22 CAR-T细胞（11例患者接受冷冻保存的CAR-T细胞，8例患者接受新鲜的CAR-T细胞）治疗的患者中，11例接受冷冻保存的CAR-T细胞治疗的患者，和8例接受新鲜的CAR-T细胞治疗的患者相比，在体内扩增、反应性和毒性方面三个方面均无显著性差异，但是其CAR -T细胞在体内的持续性降低。

总体而言，美国国家癌症研究所的数据证明，不管是传统培养袋的培养方式，还是Prodigy自动化系统培养方式培养的CAR-T细胞，冷冻保存的CAR-T细胞的效力与新鲜输注相当，毒性方面也无明显差异。这些数据对于冷冻保存在CAR-T产品推广中的应用提供了实验支持，这将对于推进细胞治疗领域至关重要。